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PDA培養(yǎng)基的配制,特點(diǎn)及用途
  • 發(fā)布日期:2023-06-20      瀏覽次數(shù):1616
    • PDA培養(yǎng)基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次對應(yīng)馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。

      特點(diǎn)及用途:
      一種常用的培養(yǎng)基,宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌
      按物理性狀劃分:固體培養(yǎng)基
      按培養(yǎng)基成分劃分:半合成培養(yǎng)基

      PDA培養(yǎng)基的配制
      (1)稱量和熬煮
      按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。
      (2)加熱溶解
      把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。
      (3)分裝
      按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。
      分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
      (4)加棉塞
      培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
      (5)包扎
      加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。

      其他事項(xiàng):
      1.培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,必須放在37℃溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長方可使用。
      2.PDA培養(yǎng)基一般不需要調(diào)pH。對于要調(diào)節(jié)pH的培養(yǎng)基,一般用pH試紙測定其pH。如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時(shí),可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時(shí)應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分。
      3.培養(yǎng)基在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基,用于菌類的震蕩培養(yǎng)。
      4.培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L培養(yǎng)基,主要是為了抑制細(xì)菌的生長,減少干擾性。

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