超濾是大分子脫鹽、濃縮的方法，重復(fù)性好，得率有保障，已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作；在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。
超濾管該如何使用？注意事項(xiàng)有哪些？讓我們一起來看看吧！
使用方法
1、預(yù)處理：
新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預(yù)冷10 min。然后將水倒出，置于冰上預(yù)冷2-5 min，加樣。
舊超濾管：倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍（注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜），置于冰上預(yù)冷2-5 min，加樣。
2、加樣：
如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內(nèi)管倒置1000×g離心1 min，移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
3、離心：
配平，12000 ×g離心（15-30 min），等達(dá)到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。
4、樣本收集 ：
外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清，如需取濃縮后樣本用于其他實(shí)驗(yàn)，則另取外管，內(nèi)管倒置，1000×g離心1-2 min。
5、超濾管清洗
使用完的超濾管用純水反復(fù)清洗5次，再用75%乙醇沖洗3次。
注意事項(xiàng)
1、短時(shí)間存放與保存：0.1 M的NaOH浸泡1-2 h，純水清洗，然后用75%乙醇浸泡，務(wù)必使濾膜保持濕潤，不能長菌。
2、長時(shí)間放置超濾管處理：0.1 M的NaOH浸泡1-2 h，純水清洗，然后用20%乙醇浸泡，務(wù)必使濾膜保持濕潤，不能長菌。
3、超濾管最大離心力不能超過12000g ，否則會導(dǎo)致濾膜破損。
4、超濾樣本會損失五分之一至二分之一的樣本量，主要取決于樣本中蛋白含量。
5、若管底有可見的蛋白沉淀，可以先加入純水，然后用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀懸起，然后倒掉，不可用自來水猛沖。
6、超濾管內(nèi)管不能用烘箱進(jìn)行烘干。
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